鱟試劑按實(shí)驗(yàn)方法可分為:凝膠法、動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑、終點(diǎn)濁度法鱟試劑、動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑、終點(diǎn)顯色法鱟試劑。
凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。凝膠法是通過觀察有無凝膠形成作為反應(yīng)的終點(diǎn)。此法操作比較簡單,經(jīng)濟(jì),不需要專用測定設(shè)備,可以進(jìn)行定性或半定量測定。
凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml/支或0.2ml/支的單個(gè)測試或0.5ml/支至5.2ml/瓶的真空封口西林瓶裝的多個(gè)測試。使用時(shí)一般應(yīng)加細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水復(fù)溶后使用。廈門鱟試劑生物科技股份有限公司的真空封口試管凝膠法鱟試劑是把鱟試劑直接灌裝在試管中,在真空中壓蓋封口的新產(chǎn)品。使用時(shí)直接用樣品溶解鱟試劑,不會割傷手,更加簡單方便安全。
特異性鱟試劑,即棄G因子鱟試劑,它專一對內(nèi)毒素起反應(yīng),避免了G因子旁路的干擾,使檢測結(jié)果更加可靠,在藥檢和臨床檢驗(yàn)方面是不可或缺的理想檢測試劑。
動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑、終點(diǎn)濁度法鱟試劑、動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑、終點(diǎn)顯色法鱟試劑,這四種方法都是定量檢測內(nèi)毒素的。這幾種定量法鱟試劑統(tǒng)稱光度法鱟試劑。
根據(jù)檢測原理,終點(diǎn)濁度法和動(dòng)態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中的濁度變化而測定內(nèi)毒素含量的方法。終點(diǎn)濁度法未見商品化產(chǎn)品。動(dòng)態(tài)濁度法(又稱動(dòng)態(tài)比濁法)是檢測反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時(shí)間,或是檢測濁度增加速度的方法。
動(dòng)態(tài)濁度法的特點(diǎn)為:
1. 能準(zhǔn)確定量。
2.檢測范圍寬,可達(dá)4個(gè)數(shù)量級。
3.靈敏度高達(dá)0.001EU/ml。
4.操作簡便,系統(tǒng)自動(dòng)檢測分析,一步即成。
5.經(jīng)濟(jì)實(shí)用,試劑樣品需要量少,可降至50μL。
6.和微生物檢測系統(tǒng)Elx808IULALXH及專用軟件TALgent使用,一次可同時(shí)檢測96個(gè)樣品。
終點(diǎn)顯色法和動(dòng)態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測定內(nèi)毒素含量的方法,根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度,又稱為比色法。顯色基質(zhì)法由于不依賴凝固蛋白形成凝膠,抗干擾能力強(qiáng),特別適用于生物制品(蛋白、疫苗等)和臨床樣品(黃疸、血液、尿液)的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測。
終點(diǎn)顯色法是目前反應(yīng)時(shí)間最短的鱟試驗(yàn)法,只需要16分鐘就能得出結(jié)果。而且使用偶氮化染色劑,避開某些有色檢品自身顏色對鱟試驗(yàn)的干擾。終點(diǎn)顯色法不需要特殊的檢測儀器就能準(zhǔn)確定量。
動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑兼有動(dòng)態(tài)濁度法和終點(diǎn)顯色法鱟試劑的優(yōu)點(diǎn),抗干擾能力強(qiáng),使用簡單方便,檢測范圍寬,靈敏度高達(dá)0.001EU/ml, 是目前世界上最好的鱟試劑。但是價(jià)格較高。
如果您僅需要檢測樣品的內(nèi)毒素限量,可以選擇凝膠法鱟試劑,通過確定內(nèi)毒素限值及最大有效稀釋倍數(shù),做樣品的干擾試驗(yàn)從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。如果您需要定量測定樣品中內(nèi)毒素含量則應(yīng)選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。日常檢測量不大時(shí),可以選擇終點(diǎn)顯色法鱟試劑,用普通的分光光度計(jì)就可完成實(shí)驗(yàn)。
如果您檢測的樣品是生物制品、疫苗、血液制品等最好選用終點(diǎn)顯色法鱟試劑或動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑。如果您日常的檢測量比較大,檢測的樣品對鱟試劑的干擾不大,可選用動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑特別適用于制藥企業(yè)對產(chǎn)品生產(chǎn)過程中的內(nèi)毒素水平的監(jiān)控。動(dòng)態(tài)濁度法與動(dòng)態(tài)顯色法需要帶溫育系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)光度測定儀器及配套軟件。
廈門鱟試劑生物科技股份有限公司推薦使用微生物檢測系統(tǒng)Elx808IULALXH和微生物檢測軟件TALgent。微生物檢測系統(tǒng)Elx808IULALXH適用于所有的定量法鱟試驗(yàn)。